文档网可免积分在线阅读和下载文档 包括资格考试、应用文书等大量word文档免费下载 Wizard 基因组DNA纯化试剂盒简明操作步骤 6．向重悬细胞溶液中加入核裂解液（300ul血样的加300ul，3ml血样的加3.0ml）。用移液枪头吸放溶液5-6次裂解白细胞。此时溶液应变得很粘稠。若混合后可见细胞团块，则将溶液置于37 oC孵育直至团块消散。若孵育1小时后仍可见细胞团块，则另加核裂解液（300ul血样的加100ul；3ml血样的加1.0ml）并重复37 oC孵育。7．非必须：向核裂解物中加入RNA酶溶液（300ul血样的加1.5ul；3ml血样的加15ul）并颠倒离心管2-5次混匀。37oC孵育15分钟，继而冷却至室温。 8．向核裂解物中加入蛋白沉淀液（300ul血样的加100ul；3ml血样的加1.0ml；见下列注释），用涡旋振荡器剧烈振荡10-20秒。可能有蛋白小团块出现。注释：若在步骤6中另加了核裂解液，那么300ul血样的应加130ul蛋白沉淀溶液；3ml血样的应加1.3ml蛋白沉淀溶液。9．300ul血样的于13,000-16,000 x g室温离心3分钟；3ml血样的于2,000 x g室温离心10分钟。此时，应可见深棕色蛋白沉淀。若无沉淀，可能是①蛋白沉淀液加入之前样品没有冷至室温或②第8步没有混合均匀。10.300ul血样：将其上清转至干净的装有300ul室温异丙醇的1.5ml离心管中。3ml血样：将其上清转至干净的装有3ml室温异丙醇的15ml离心管中。注释：为避免DNA被蛋白污染，保留少许上清，勿吸取得过于彻底。11．轻轻颠倒以混匀溶液，直至白色线状DNA形成沉淀。 12．300ul血样的于13,000-16,000 x g室温离心1分钟；3ml血样的于2,000 x g室温离心1分钟。可见白色小块状DNA沉淀。13．弃去上清，加入与样本量等体积的室温70%乙醇，轻轻颠倒离心管数次清洗DNA沉淀和管壁，依照12步离心。14. 使用巴斯德吸管或测序加样枪头小心吸走乙醇溶液。此时的DNA沉淀十分松弛，因此需格外小心避免将DNA沉淀吸进管中。将离心管倒置在干净的吸水纸上，自然干燥10-15分钟。15．向离心管中加入DNA溶解液 （DNA Rehydration Solution）（300ul血样的加100ul；3ml血样的加250ul），65oC孵育1小时溶解DNA。期间可轻弹管壁混匀溶液。也可以室温或4oC孵育过夜。 16. 2-8oC保存DNA。 III. 从全血（10ml）中提取基因组DNA经我们测试，从EDTA、肝素及柠檬酸抗凝管保存的新鲜全血中提取的基因组DNA对于随后的DNA操作，包括PCR，没有任何不利影响。抗凝血样本可在2-8 oC保存至多2个月，但保存时间越长，DNA产量会下降越多。冷冻血样也可使用该操作方法，但产量会低于新鲜血样，而且需更多的细胞裂解液处理。大规模提取基因组DNA试剂盒（目录号A1620）可处理多至1升的全血样品。该试剂盒不含RNA酶溶液，因为RNA酶消化是非必须步骤。可单独购买RNA酶A溶液（4mg/ml，目录号A7973）。若有必要，处理1升全血需要5ml RNA酶A溶液。请使用者准备： z 无菌50ml离心管 z 37oC水浴 z 异丙醇，室温 z 70%乙醇，室温z 65oC水浴（非必须，用于快速溶解DNA）普洛麦格（北京）生物技术有限公司 电话：800 810 8133，010 58256268 网址：http://www.wendangwang.com; http://www.wendangwang.com CTM050修改于5/09 第3页 promega公司全血DNA提取试剂盒说明书相关文档 promega公司全血DNA提取试剂盒说明书promega公司全血DNA提取... 11页 1下载券 人教版八年级语文半期考... 8页 1下载券promega公司全血DN...E6全血基因组DNA及线粒体DNA提取试剂说明书五、 储存条件:本试剂盒在室温条件下可保存两年。 一步裂解法全血基因组 DNA 提取试剂与 promega 全血基因组 DNA 提取试剂的比 较 1 2 3 4 5 6 7 8 图...promega 小提质粒提取说明书promega 小提质粒提取说明书_信息与通信_工程科技_专业资料。Wizard○ Wizard○R Purefection Plasmid DNA Purification System protocol 所用试剂盒为 Promega 公司...Promega RNA 试剂盒(中文)Promega RNA 试剂盒(中文)_农学_高等教育_教育...细胞和血液中提取总 RNA 的试剂:? 2. 配制试剂?...(RWA)以及 DNA 酶终止液(DSA)指本试剂盒中提 供......有限公司 - Invitrogen DNA提取试剂盒使用说明北京思尔成生物技术有限公司 Invitrogen DNA 提取试剂盒使用说明书样品制备 1. 0.5ml-1.5ml 抗凝全血, 静脉取血如果 24h 内用就室温保存。 0-5°C 保存一...改良盐析法提取全血基因组DNA的影响因素研究_张帅根据 Promega 公司 全血基因组DNA提取试剂盒说明书提取全血DNA。 主要步骤如下: 取人抗凝全血 300μL, 加入 900mL 红细胞裂解液,混匀后室温放置 10min,期1.3...2011.10.12全血基因组DNA的提取2、全血DNA提取试剂盒(TaKaRa宝生物工程公司) 试剂盒组成: GenTLE solution Ⅰ GenTLE solution Ⅱ GenTLE solution Ⅲ 3、异丙醇、70%乙醇。 1瓶 2瓶 1瓶 各...凝固血基因组DNA提取试剂盒凝固血基因组DNA提取试剂盒_生物学_自然科学_专业资料。凝固血基因组DNA提取试剂盒产品说明书!◆◆◆ 凝固全血基因组DNA提取系统 目录号 1431 使用手册 实验室使...DNA提取全血基因组 DNA 提取试剂盒 产品说明 本试剂盒是专门用于从全血细胞中提取基因...全血提取试剂盒一般有离心柱和溶液型两 种(比如 Qiagen、Promega、Bioteke;摒弃...